Pasteurisieren oder Sterilisieren seines Substrats?
Pasteurisierung
Diese Methode besteht darin, das Substrat für eine bestimmte Zeit bei moderaten Temperaturen (in der Regel zwischen 60°C und 80°C) zu erhitzen. Das Ziel ist es, die Populationen unerwünschter Mikroorganismen zu reduzieren, ohne sie vollständig zu eliminieren, und gleichzeitig bestimmte nützliche Bakterien zu erhalten, die das Wachstum anderer Kontaminanten hemmen können. Die Pasteurisierung wird häufig beim Anbau von Pilzen wie Austernseitlingen verwendet, da sie kostengünstiger ist und keine komplexe Ausrüstung erfordert.
Sterilisation
Im Gegensatz zur Pasteurisierung zielt die Sterilisation darauf ab, alle im Substrat vorhandenen Mikroorganismen zu eliminieren. Dies geschieht in der Regel durch Anwendung von Hitze bei deutlich höheren Temperaturen (über 121 °C) unter Druck (Autoklav) oder durch chemische Methoden. Die Sterilisation ist für den Anbau von Pilzen, die empfindlicher gegenüber Kontaminationen sind, wie Shiitake-Pilze, unerlässlich und gewährleistet eine vollständig aseptische Umgebung.
Warum sollte ich mein Substrat pasteurisieren, wenn das in der Natur nicht so abläuft?
Es ist wahr, dass Pilze in der Natur ohne menschliches Eingreifen wachsen, aber die Bedingungen sind dort sehr unterschiedlich. Im Freien müssen Pilze oft mit anderen Organismen konkurrieren, und nur die Stärksten überleben. Außerdem produzieren Pilze Millionen von Sporen, hauptsächlich weil ihre Überlebenschancen in Wirklichkeit sehr gering sind. Die Erfolgschancen in der Natur sind gering.
Beim Anbau von Pilzen besteht das Ziel darin, die Erfolgschancen zu maximieren. Durch die Pasteurisierung des Substrats reduzieren Sie die Menge potenzieller Kontaminanten und verschaffen dem Myzel somit einen Vorteil, um das Substrat schnell zu besiedeln.
Außerdem vermeiden Sie durch sauberes Arbeiten die Einführung neuer Kontaminanten, was für empfindlichere Pilzsorten entscheidend ist.
Sauberkeit und Pasteurisierung schaffen optimale Bedingungen für das Wachstum der Pilze, die Sie züchten, und erhöhen Ihre Erfolgschancen.
Pasteurisieren oder sterilisieren?
Zwei Haupttechniken werden dafür verwendet: Pasteurisierung und Sterilisation. Obwohl diese Begriffe ähnlich erscheinen mögen, unterscheiden sie sich erheblich in Bezug auf Verfahren, Ziel und Anwendung. Um diese Unterschiede zu verdeutlichen, folgt hier eine einfache Vergleichstabelle, gefolgt von einer Erklärung der Verwendung jeder Methode.
Merkmale
Pasteurisierung
Sterilisation
Temperatur
60-80°C
>121°C (unter Druck)
Dauer
1 bis 2 Stunden
15-30 Minuten (bei hoher Temperatur)
Objektiv
Reduzieren Sie die Menge der Schadstoffe
Alle Mikroorganismen beseitigen
Überlebende Mikroorganismen
Ja, einige vorteilhafte
Keiner (sterile Umgebung)
Typische Substrate
Stroh, Holzspäne, Kompost
Myzel auf Körnern, zuckerreiche Substrate
Risiken einer Kontamination nach der Behandlung
Niedrig bis mittel
Erhöht, wenn das Umfeld nicht steril gehalten wird
Hinweis: Jeder Pilzzüchter entwickelt im Laufe der Zeit seine eigenen Techniken. Die hier gegebenen Hinweise sollen Sie nicht davon abhalten, eigene Experimente durchzuführen, um Ihre Fähigkeiten zu erweitern.
Typische Verwendungen
Substrate auf Stroh-Basis? -> Pasteurisierung
Stroh ist ein häufig verwendetes Substrat für den Anbau von Pilzen wie Austernseitlingen. Es eignet sich gut zur Pasteurisierung, da es eine Behandlung erfordert, die die meisten Kontaminanten beseitigt und gleichzeitig eine gewisse nützliche mikrobielle Flora erhält.
Myzel auf Körnern? -> Sterilisation
Die Körner, die zur Kultivierung des Myzels verwendet werden, sind nährstoffreich, was sie sehr anfällig für Kontaminationen macht, wenn unerwünschte Mikroorganismen vorhanden sind. Eine vollständige Sterilisation ist notwendig, um jegliches Kontaminationsrisiko zu beseitigen.
Kompostsubstrate? -> Pasteurisierung
Die kompostierten Substrate, die häufig für Champignons de Paris verwendet werden, werden pasteurisiert, um Mikroorganismen zu kontrollieren, ohne die nützlichen Thermophilen zu eliminieren, die bei der Zersetzung des Komposts helfen.
Substrate auf Holzspänebasis? -> Pasteurisierung
Holzspäne, die für Pilze wie Stropharia oder Shiitake verwendet werden, profitieren von der Pasteurisierung, die Konkurrenten reduziert und gleichzeitig eine Struktur erhält, die die Besiedlung durch das Myzel begünstigt.
Substrate reich an Zucker und Stickstoff? -> Sterilisation
Diese Substrate, die oft für empfindlichere oder spezifischere Kulturen verwendet werden, werden sterilisiert, um jegliche mikrobielle Konkurrenz zu verhindern, da Zucker und Stickstoff das schnelle Wachstum von Kontaminanten fördern.
Pasteurisierungstechniken für den Pilzanbau
1) Die Pseudo-Pasteurisierung mit Heißwasser
Die Pseudopasteurisierung mit heißem Wasserist eine einfache und schnelle Methode, die oft von Hobby-Pilzzüchtern oder für Kleinmengen verwendet wird. Diese Technik besteht darin, kochend heißes Wasser, typischerweise aus einem Wasserkocher, direkt auf das Substrat zu gießen. Obwohl diese Methode aufgrund der begrenzten Hitzeeinwirkungszeit nicht so effektiv ist wie die traditionelle Pasteurisierung, kann sie dennoch die mikrobielle Belastung des Substrats erheblich reduzieren.
Prinzip und Grenzen :
Prinzip: Wenn kochendes Wasser auf das Substrat gegossen wird, tötet die Hitze einen Teil der vorhandenen Mikroorganismen ab. Das Substrat bleibt jedoch nicht lange genug bei einer ausreichend hohen Temperatur (zwischen 60°C und 80°C), um die widerstandsfähigsten Kontaminanten vollständig zu eliminieren, wie es bei der traditionellen Pasteurisierung möglich ist.
Grenzen: Aufgrund der kurzen Belichtungszeit bietet diese Methode nicht die gleiche Garantie für die Beseitigung unerwünschter Mikroorganismen. Einige widerstandsfähigere Kontaminanten können überleben und möglicherweise mit dem Myzel konkurrieren, sobald das Substrat inokuliert ist.
Anwendungen und Beispiele :
Strohpellets für Austernpilze: Diese Methode funktioniert gut mit Strohpellets. Das zu Pellets gepresste Stroh ist ein ideales Substrat für den Anbau von Austernpilzen. Durch die Verwendung der Pseudo-Pasteurisierung können Sie diese Pellets schnell und effektiv für eine erfolgreiche Kultivierung vorbereiten.
Buchenpellets für Shiitake und Löwenmähne: Ebenso können die Buchenpellets, die für den Anbau von Shiitake und Löwenmähne (Hericium erinaceus) geeignet sind, von dieser Technik profitieren. Obwohl Buche ein dichteres Holz als Stroh ist, kann kochendes Wasser dennoch das Kontaminationsrisiko verringern und bietet ein relativ sauberes Substrat für die Inokulation.
Vorteile :
Schnelligkeit: Die Pseudo-Pasteurisierung ist schnell durchzuführen, was sie zu einer praktischen Methode für kleine Substratmengen macht.
Einfachheit: Es wird keine spezielle Ausrüstung benötigt, nur ein Wasserkocher und ein Behälter zur Aufnahme des Substrats.
Nachteile:
Begrenzte Wirksamkeit: Diese Methode beseitigt nicht alle Mikroorganismen, was das Risiko einer Kontamination während der Kultivierung erhöhen kann.
Nicht für alle Substrate geeignet: Für dichtere oder nährstoffreichere Substrate, wie sie für Myzel auf Körnern verwendet werden, wäre eine traditionelle Sterilisation oder Pasteurisierung erforderlich.
2) Dampfsterilisation
Die Hitzepasteurisierung ist eine der ältesten und am häufigsten verwendeten Methoden zur Vorbereitung des Substrats für den Pilzanbau. Diese Technik besteht darin, das Substrat für eine Dauer von 1 bis 2 Stunden auf eine Temperatur von 60 bis 80 °C zu erhitzen. Dieser Prozess tötet die Mehrheit der unerwünschten Mikroorganismen ab, während einige nützliche Mikroben intakt bleiben, die helfen können, aggressivere Kontaminanten zu hemmen.
Schritte der Hitzepasteurisierung:
Vorbereitung des Substrats: Das Substrat, oft Stroh, Holzspäne oder Sägemehl, wird zunächst befeuchtet, um eine gleichmäßige Wärmeverteilung während des Prozesses zu gewährleisten. Es wird empfohlen, Ihr Substrat 12 bis 24 Stunden in Wasser einzuweichen, um die vorhandenen Sporen und Bakterien "aufzuwecken".
Heizung: Das Substrat wird anschließend in einen hitzebeständigen Behälter oder Beutel gegeben und dann in heißes Wasser getaucht oder Dampf ausgesetzt. Die Temperatur muss mindestens eine Stunde lang zwischen 60 und 80 °C gehalten werden, um eine effektive Pasteurisierung zu gewährleisten.
Kühlung: Nach der Wärmebehandlung muss das Substrat auf Raumtemperatur abgekühlt werden, bevor es mit dem Myzel inokuliert wird. Diese Abkühlung muss schnell erfolgen, um zu verhindern, dass während dieser Zeit Kontaminanten eindringen.
Vorteile der Hitzepasteurisierung:
Effizienz: Entfernt effektiv die Mehrheit der unerwünschten Mikroorganismen.
Anpassungsfähigkeit: Geeignet für verschiedene Substratarten, insbesondere Stroh und kompostbasierte Substrate.
Einfachheit: Erfordert nur grundlegende Ausrüstung wie einen beheizten Behälter oder einen Dampferzeuger.
3) Kalkpasteurisierung (Calciumhydroxid)
Die Kalkpasteurisierung ist eine alternative Methode zur Hitzepasteurisierung zur Vorbereitung des Kultursubstrats für Pilze. Diese Methode verwendet gelöschten Kalk (weißen Kalkstein), um den pH-Wert des Substrats zu erhöhen, was das Wachstum vieler Bakterien und Schimmelpilze hemmt, während das Myzel von Pilzen wie Austernseitlingen wachsen kann.
Schritte der Kalkpasteurisierung:
Verwenden Sie gelöschten Kalk (weißer Kalkstein). Vermeiden Sie kalkreiche Magnesiumverbindungen.
Lösen Sie etwa 1 Tasse gelöschten Kalk in etwa 50 Litern Wasser auf. Dieses Verhältnis kann je nach Menge des Substrats und der Konzentration des Kalks leicht variieren.
Tauchen Sie das Substrat in die Kalklösung. Stellen Sie sicher, dass das gesamte Substrat gut eingetaucht ist. Lassen Sie das Substrat etwa 12 Stunden in der Kalklösung einweichen.
Nach dem Einweichen das Substrat gut abtropfen lassen, um die überschüssige Kalklösung zu entfernen. Das Substrat sollte feucht, aber nicht durchnässt sein.
Mischen Sie das behandelte Substrat mit 5 bis 10 % Pilzmyzel bezogen auf das Nassgewicht des Substrats.
Vorteile der Kalkpasteurisierung:
Einfachheit: Weniger Ausrüstung erforderlich im Vergleich zur Hitzepasteurisierung.
Wirksamkeit: Hemmung von Bakterien und Schimmel durch Erhöhung des pH-Werts.
Anpassungsfähigkeit: Kann für verschiedene Arten von lignozellulosehaltigen Substraten verwendet werden.
Kalk, wenn er angemessen verwendet wird, gilt im Allgemeinen nicht als umweltschädlich. Es ist jedoch wichtig, ihn sorgfältig einzusetzen, um potenzielle negative Auswirkungen zu vermeiden. Hier sind einige Punkte, die zu beachten sind:
Auswirkungen auf den Boden:Eine übermäßige Kalkung kann den pH-Wert des Bodens verändern, was die Bodenbiodiversität und die Verfügbarkeit von Nährstoffen für Pflanzen beeinträchtigen kann.
Umgebendes Wasser:Wenn Kalk in großen Mengen in der Nähe von Gewässern verwendet wird, kann er den pH-Wert des Wassers erhöhen, was empfindliche aquatische Organismen, die auf pH-Änderungen reagieren, beeinträchtigen könnte.
Biologische Abbaubarkeit :Kalk ist eine mineralische Verbindung, die sich nicht auf die gleiche Weise wie organische Substanzen zersetzt. Er verbleibt in der Umwelt, kann sich jedoch allmählich neutralisieren.
4) Anaerobe Pasteurisierung
Die anaerobe Pasteurisierung ist eine alternative Methode, die weder Wärme noch Chemikalien benötigt. Sie beruht auf der Schaffung einer sauerstofffreien Umgebung, die das Überleben unerwünschter aerober Mikroorganismen verhindert.
Schritte der anaeroben Pasteurisierung:
Verlängertes Eintauchen: Das Substrat wird in Wasser getaucht und für einen längeren Zeitraum, in der Regel 10 bis 15 Tage, in einem luftdichten Behälter gelagert. Ohne Sauerstoff sterben die aeroben Mikroorganismen, während das Myzel, das leicht anaerobe Bedingungen tolerieren kann, eine günstige Umgebung für sein Wachstum findet.
Fermentation: Während dieser Einweichzeit kann das Substrat zu fermentieren beginnen. Dieser Fermentationsprozess kann einige organische Verbindungen in Säuren umwandeln, was das Substrat noch günstiger für die Besiedlung durch das Myzel bestimmter Pilzarten, wie Austernpilze, machen kann.
Vorteile der Anaeroben Pasteurisierung :
Wirtschaftlich: Benötigt weder thermische Energie noch Chemikalien.
Subtilität: Bewahrt die Eigenschaften des Substrats, während es für die Besiedlung durch das Myzel geeignet gemacht wird.
Geeignet für bestimmte Pilze: Besonders wirksam für Sorten wie Austernpilze, die leicht fermentierte Substrate bevorzugen.
5) Die Super-Pasteurisierung
Die Hochpasteurisierung ist eine fortgeschrittene Technik, die besonders angewendet wird, wenn das Substrat ergänzt wird oder ein hohes Kontaminationsrisiko besteht. Es ist die empfohlene Technik mit unseremoptimalen Substratzum Beispiel.
Und so funktioniert es:
Temperatur und Dauer: Die Hochpasteurisierung erfolgt mit Dampf bei einer Temperatur von etwa 90°C, ohne zusätzlichen Druck. Die Dauer des Prozesses ist verlängert, zwischen 12 und 24 Stunden, deutlich länger als bei der herkömmlichen Pasteurisierung.
Vorteile: Diese Methode ist wirksam, um nicht nur unerwünschte Mikroorganismen, sondern auch deren Sporen zu eliminieren, während einige thermophile Mikroorganismen erhalten bleiben, die helfen können, ein biologisches Gleichgewicht im Substrat aufrechtzuerhalten.
Verwendung: Empfohlen für supplementierte Substrate oder solche mit hohem Kontaminationsrisiko, ist die Super-Pasteurisierung eine Technik, die hilft, das Kontaminationsrisiko zu reduzieren, ohne die Zusammensetzung des Substrats zu stark zu verändern.
Im Allgemeinen verwenden Pilzzüchter, die diese Technik anwenden, 200-Liter-Metallfässer, in denen sie am Boden einen elektrischen Widerstand anbringen. Ein falscher Boden in Form eines Gitters wird in einer Höhe von 15 bis 20 cm über dem Widerstand installiert, auf dem die in Beuteln mikrofiltriertenSubstrateplatziert werden. EinTemperaturreglermit einer Sonde, die im oberen Teil des Fasses platziert ist, ermöglicht die Temperaturregelung: Der elektrische Widerstand schaltet sich ein, solange die gewünschte Temperatur (zum Beispiel 95°C) nicht erreicht ist, und schaltet sich aus, sobald die Temperatur erreicht ist. Es ist wichtig zu überprüfen, ob die Leistung des Widerstands der vom Regler tolerierten entspricht, andernfalls wird empfohlen, ein elektrisches Relais-System zu verwenden. Um die Energieeffizienz zu verbessern, wird außerdem empfohlen, die Außenseite des Fasses zu isolieren, um Wärmeverluste zu minimieren.
6) Pasteurisierung durch Kompostierung
Die Pasteurisierung durch Kompostierung ist eine häufig verwendete Methode zur Vorbereitung des Substrats für den Anbau von Champignons (Agaricus bisporus). Diese Technik nutzt die durch die natürliche mikrobielle Aktivität während des Kompostierungsprozesses erzeugte Wärme, um das Substrat zu pasteurisieren und so unerwünschte Mikroorganismen und Krankheitserreger zu eliminieren.
Schritte der Pasteurisierung durch Kompostierung:
Vorbereitung des Substrats: Mischen Sie etwa 75 % Mist (idealerweise Pferdemist) mit 25 % Stroh. Diese Mischung bildet die Grundlage des Komposts. Fügen Sie Wasser hinzu, um die Mischung zu befeuchten, achten Sie jedoch darauf, dass sie nicht durchnässt ist, um eine gute mikrobielle Zersetzung zu gewährleisten.
Kompostierung: Bilden Sie einen Komposthaufen von mindestens 1 Kubikmeter, um eine gute Temperaturerhöhung zu gewährleisten. Wenden Sie den Haufen regelmäßig (alle 2 bis 3 Tage), um ihn zu belüften und eine gleichmäßige Zersetzung zu fördern.
Natürliche Erwärmung: Die durch die Kompostierung erzeugte natürliche mikrobielle Aktivität erhöht die Temperatur des Haufens. Sie sollten eine Innentemperatur von 60 bis 70 °C anstreben. Halten Sie diese Temperatur etwa 7 bis 14 Tage lang, um das Substrat zu pasteurisieren.
Mélange: Wenden Sie den Komposthaufen alle 2 bis 3 Tage. Dies sorgt für Belüftung des Komposts, verteilt die Feuchtigkeit neu und fördert eine gleichmäßige Temperaturerhöhung im gesamten Haufen.
Kühlung: Nach der Pasteurisierungsphase lassen Sie den Kompost auf Raumtemperatur abkühlen, bevor Sie ihn für die Aussaat verwenden.
Beimpfung: Sobald der Kompost abgekühlt ist, mischen Sie ihn mit Champignon-Myzel. Verwenden Sie etwa 1 bis 2 % Myzel im Verhältnis zum Gewicht des Substrats, um eine effektive Besiedlung zu gewährleisten.
Vorteile der Pasteurisierung durch Kompostierung:
Nährstoffreichtum: Das Kompostieren verbessert die Nährstoffqualität des Substrats und macht es ideal für den Anbau von Champignons de Paris.
Ökologisch: Verwendet natürliche Ressourcen (Mist und Stroh) und basiert auf biologischen Prozessen, ohne externe Wärme oder Chemikalien zu benötigen.
Wirksamkeit gegen Krankheitserreger: Die natürliche Temperaturerhöhung beseitigt effektiv die meisten Kontaminanten und Krankheitserreger im Substrat.
Sterilisation
Die Sterilisation ist eine entscheidende Technik für den Anbau von Pilzen, insbesondere wenn man mit nährstoffreichen Substraten wie Körnern arbeitet. Sie besteht darin, alle Mikroorganismen im Substrat durch Erhitzen auf sehr hohe Temperaturen (in der Regel über 121°C) unter Druck, typischerweise mit einem Autoklaven, zu eliminieren. Diese Methode ist unerlässlich, da nährstoffreiche Substrate einen fruchtbaren Boden für die schnelle Vermehrung von Kontaminanten wie Bakterien und Schimmel bieten, wenn sie nicht vollständig sterilisiert sind.
Vorsichtsmaßnahmen:
Sterile Umgebung:Ein steriles Substrat ist äußerst anfällig für Kontaminationen, sobald es der Luft ausgesetzt oder gehandhabt wird. Nach der Sterilisation muss das Substrat in einer vollständig sterilen Umgebung gehandhabt werden, um die Einführung unerwünschter Mikroorganismen zu vermeiden. Dies umfasst die Verwendung einer Laminar-Flow-Haube, steriler Handschuhe und strenger aseptischer Techniken, wie die regelmäßige Desinfektion der Arbeitsflächen und das Tragen von Gesichtsmasken. Selbst eine kurze Exposition gegenüber nicht steriler Luft kann Sporen von Kontaminanten einbringen und somit die gesamte Sterilisationsarbeit zunichtemachen.
Risiko einer Kontamination nach der Behandlung:Die Sterilisation ist nur wirksam, wenn das Substrat während des gesamten Kultivierungsprozesses in einer sterilen Umgebung verbleibt. Nach der Sterilisation kann das Substrat schnell wieder kontaminiert werden, wenn die aseptischen Verfahren nicht strikt eingehalten werden. Es ist entscheidend, während der gesamten Inkubationszeit eine sterile Umgebung aufrechtzuerhalten, bis das Myzel das Substrat vollständig kolonisiert hat. Dies erfordert Arbeiten unter kontrollierten Bedingungen und die Minimierung von Eingriffen nach der Inokulation.
Verwendung des Autoklaven :
Bei der Verwendung eines Autoklaven ist es entscheidend, die spezifischen Anweisungen des Herstellers bezüglich der Sterilisationszeiten und der empfohlenen Temperaturen, den sogenannten "Barèmes", zu befolgen. Diese Parameter können je nach verschiedenen Faktoren variieren, wie dem verwendeten Behältertyp (Glas, Kunststoff usw.), der Menge des Substrats, dem Feuchtigkeitsgehalt und der Korngröße (Partikelgröße) des Substrats. Es ist oft notwendig, diese Parameter nach einigen Versuchen anzupassen, um den Prozess entsprechend diesen Variablen zu optimieren.
Anpassung der Skalen:Autoklaven mit unterschiedlichen Leistungen und Ausführungen können unterschiedliche Heizleistungen aufweisen. Daher kann die Sterilisationsdauer mehr oder weniger lang sein. Es wird empfohlen, Tests durchzuführen, um die optimalen Einstellungen entsprechend den Besonderheiten Ihres Autoklaven und der von Ihnen verwendeten Substrate zu bestimmen.
Vakuumfunktion:Viele hochwertige Autoklaven bieten eine "Vakuum"- oder "Vorheizfunktion", die für eine gleichmäßige Sterilisation unerlässlich ist. Diese Funktion ermöglicht es, die Luft aus der Sterilisationskammer zu entfernen, entweder durch Vakuumerzeugung oder durch eine Vorheizsequenz, bei der die Kammer mit Wasserdampf gefüllt wird. Die Entfernung der Luft ist entscheidend, da Wasserdampf viel effektiver Wärme überträgt als trockene Luft. Durch das Entfernen der Luft aus der Kammer kann der Dampf das Substrat gleichmäßig durchdringen und sicherstellen, dass alle Teile des Substrats die erforderliche Sterilisationstemperatur für eine ausreichende Dauer erreichen.
Experimentieren und Anpassen:Je nach Leistung Ihres Autoklavs kann die Dauer des Aufheizens und Haltens variieren. Leistungsstärkere Autoklaven erreichen die gewünschte Temperatur schneller und erfordern möglicherweise Anpassungen der Sterilisationszeit, um eine Überhitzung des Substrats zu vermeiden. Darüber hinaus verbessert die korrekte Verwendung der Vakuum- und Luftauslassfunktion nicht nur die Gleichmäßigkeit der Sterilisation, sondern verhindert auch kalte Lufttaschen, die die Wirksamkeit des Prozesses beeinträchtigen könnten.
Zusammenfassend sind Pasteurisierung und Sterilisation wesentliche, aber unterschiedliche Werkzeuge für den Anbau von Pilzen. Die schonendere Pasteurisierung schafft ein günstiges Umfeld, während einige nützliche Mikroorganismen erhalten bleiben, während die Sterilisation ein substrat frei von jeglicher mikrobieller Konkurrenz bietet und anschließend extreme Vorsichtsmaßnahmen erfordert, um eine Rekontamination zu vermeiden.
Die Wahl zwischen diesen Methoden hängt von der Art des verwendeten Substrats, den angebauten Pilzen und den verfügbaren Anbaubedingungen ab.
